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2015-11-16影響western blot實(shí)驗(yàn)的幾個(gè)因素
2022-04-20
產(chǎn)品型號(hào)：
更新時(shí)間：2025-01-23
所有產(chǎn)品僅供科研使用，不能用于食用和醫(yī)療等
| 產(chǎn)品中文： | 人凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒 | ||
| 產(chǎn)品英文： | Human Gelsolin ELISA KIT | ||
| 信帆生物為大家提供高品質(zhì)ELISA試劑盒，我們有專(zhuān)門(mén)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)，售前 售中售后，全程提供技術(shù)指導(dǎo)，免除您實(shí)驗(yàn)的后顧之憂。 試劑盒保障，有質(zhì)量問(wèn)題，免費(fèi)包退換。 提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，讓您省時(shí)省心。 和各大快遞公司都有合作，保證發(fā)貨及時(shí)，運(yùn)輸無(wú)憂。 現(xiàn)在訂購(gòu)即送精美禮物一份，索要說(shuō)明書(shū)或者樣本處理信息。 | |||
| 試劑盒組成： | |||
| 試劑盒組成 | 48T | 96T | 保存 |
| 說(shuō)明書(shū) | 1份 | 1份 | |
| 封板膜 | 2片（48） | 2片（96） | |
| 密封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) | |
| 酶標(biāo)包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 酶標(biāo)試劑 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 終止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 濃縮洗滌液 | (20倍)20ml×1瓶 | (30倍)20ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 人凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒 | |||
| 操作步驟 | |||
| 1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為30ng/L，20ng/L ，10ng/L，5ng/L， 2.5ng/L）。 | |||
| 2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。 | |||
| 3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 | |||
| 4. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。 | |||
| 5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。 | |||
| 6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。 | |||
| 7. 溫育：操作同3。 | |||
| 8. 洗滌：操作同5。 | |||
| 9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. | |||
| 10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。 | |||
| 11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。 | |||
| 人凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒 | |||
| 注意事項(xiàng)： | |||
| 1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。 | |||
| 2． 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。 | |||
| 3． 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，使用排槍加樣。 | |||
| 4． 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。 | |||
| 5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 | |||
| 6． 底物請(qǐng)避光保存。 | |||
| 7． 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn). | |||
| 8． 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。 | |||
| 9． 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。 | |||
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| 人凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒 | |||
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