抗壞血酸氧化物酶測試盒（APX）

（Ascorbate Peroxidase，分光光度法 50 管/48 樣）

一、測定意義：

抗壞血酸氧化物酶（Aseorbate Peroxidase，APX）是以

抗壞血酸為電子供體且專一性強的氧化物酶，主要存在于植

物葉綠體和胞漿中，是葉綠體中清除H2O2關(guān)鍵酶，也是抗壞血

酸代謝的重要抗氧化酶。H2O2是植物葉綠體中光合電子傳遞鏈

和某些酶反應(yīng)的天然產(chǎn)物，是具有毒害作用的活性氧。APX具

有多種同功酶，主要分為兩大類型：一種為位于葉綠體中并分

解葉綠體中的H2O2的葉綠體型同工酶；另一種為位于葉綠體之

外的其它細(xì)胞組分（分別定位于胞質(zhì)、線粒體、氧化物和乙

醛酸體，以及氧化體和類囊體膜上）的細(xì)胞質(zhì)型同工酶。

二、測定原理：

抗壞血酸氧化物酶（APX）催化抗壞血酸（ASA）與過

氧-化氫（H2O2）反應(yīng)，使ASA氧化成單脫氫抗壞血酸（MDASA）。

隨著AsA被氧化，溶液中290nm波長下的吸光度值（A290）下降，

根據(jù)單位時間內(nèi)A290減少值，計算抗壞血酸氧化物酶（APX）

活性。ASA氧化量按消光系數(shù)2.8(mol/mL)/cm計算。

三、自備儀器用品：

低溫離心機、紫外分光光度、1cm光徑石英比色皿、移液槍、

研缽、冰和蒸餾水

五、【儲存條件及有效期】

試劑于 2～8℃保存可穩(wěn)定 3 個月。

六、操作步驟

1、粗酶液提取：

按組織質(zhì)量（g）：緩沖液體積（mL）=1:9的比例加入

試劑一（如0.1g組織加入0.9mLR1緩沖液），冰水浴勻漿，

10000rpm/min，離心10min，取上清待測。

抗壞血酸氧化物酶測試盒（APX）