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膠立染（考馬斯亮藍(lán)染色液替代品）

考馬斯亮藍(lán)有G-250和R-250兩種。

游離狀態(tài)的考馬斯亮藍(lán)G250 在酸性溶液中呈紅褐色，與蛋白質(zhì)結(jié)合后呈藍(lán)色，蛋白質(zhì)含量與顏色的深淺成正比，經(jīng)595nm 測(cè)定，可作出蛋白質(zhì)含量與吸光度值的標(biāo)準(zhǔn)曲線，并求出未知樣品的蛋白質(zhì)濃度。

 蛋白質(zhì)與考馬斯亮藍(lán)G-250結(jié)合在2min左右的時(shí)間內(nèi)達(dá)到平衡，完成反應(yīng)十分迅速；其結(jié)合物在室溫下1h內(nèi)保持穩(wěn)定。該法是1976年Bradford建立，試劑配制簡(jiǎn)單，操作簡(jiǎn)便快捷，反應(yīng)非常靈敏，靈敏度比Lowry法還高4倍，可測(cè)定微克級(jí)蛋白質(zhì)含量，測(cè)定蛋白質(zhì)濃度范圍為0～1 000μg/mL，是一種常用的微量蛋白質(zhì)快速測(cè)定方法。

考馬斯亮藍(lán)有G-250和R-250兩種。其中考馬斯亮藍(lán)G-250由于與蛋白質(zhì)的結(jié)合反應(yīng)十分迅速，常用來(lái)作為蛋白質(zhì)含量的測(cè)定。考馬斯亮藍(lán)R-250與蛋白質(zhì)反應(yīng)雖然比較緩慢，但是可以被洗脫下去，所以可以用來(lái)對(duì)電泳條帶染色。

該方法用于大多數(shù)蛋白質(zhì)的定量是比較精確的，但不適用于小分子堿性多肽的定量。如核糖核酸酶或溶菌酶。去污劑的濃度超過(guò)0．2%影響測(cè)定結(jié)果，如TritonX-100、SDS、NP-40等。常用于細(xì)胞骨架的檢驗(yàn)。

膠立染（考馬斯亮藍(lán)染色液替代品）