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His（6xHis）單抗，His標簽單抗又叫6×His標簽單抗，或6×His單克隆抗體，用小鼠制備，HIS可被鎳柱吸附，用于純化重組蛋白。

Ni IDA Beads 可以用于各種表達來源(如大腸桿菌、酵母、昆蟲細胞和哺乳動物細胞) 的組氨酸標簽(6xHis-tagged)蛋白的純化。它是以 4%瓊脂糖凝膠為基質(zhì)

6xHis 標簽，也稱為多組氨酸標簽， His6 標簽或 hexa 組氨酸標簽, 是一種在轉(zhuǎn)染的細胞中目標蛋白的 C 端或 N 端上由至少 6 個組氨酸殘基鏈接上所組成的氨基酸序列。這種標簽通常在重組蛋白的純化中使用，這是因為組氨酸殘基的序列可以在特定的緩沖液條件下結(jié)合到幾種類型固定的離子上（比如鎳，鈷和銅）從而達到容易檢測和純化 His 標簽蛋白的目的。
由于它的相對小的分子量，低的免疫原性，親水性和在去污劑和其他添加劑存在的情況下的易變性, 因此在天然和變性的條件下，多組氨酸標簽是被*為廣泛使用的親和標簽用于一系列的蛋白純化目的。
除此之外，它可以檢測和純化重組蛋白而無需使用蛋白特異性的抗體或探針，同時抗 His 標簽抗體的存在用于 His 標簽蛋白的檢測中使 6xHis 標簽更加的普遍和受歡迎。
親和純化蛋白
在大腸桿菌和其他原核系統(tǒng)中表達的多組氨酸標簽重組蛋白通常使用固定的金屬離子親和色譜來純化或稱為 IMAC. 在這個過程中，支撐物 (通常是珠狀瓊脂糖凝膠或磁珠顆粒) 用合適的耦合試劑來進行衍生，比如氨三乙酸 nitrilotriacetic acid (NTA) 或亞氨乙酸 iminodiacetic acid (IDA).
這些螯合的基團會固定所需要的二價金屬離子 (比如鎳，銅，鈷和鋅)，從而這些金屬離子負責結(jié)合和分離混合液蛋白中的目標分子。在選擇使用哪個配基上，你需要考慮 IMAC 樹脂的結(jié)合能力主要取決于被純化蛋白的性質(zhì)和在純化過程中所使用的金屬離子。
注意：需要更加深入完整的了解如何選擇的螯合試劑來達到我的目的，請參考我們之前發(fā)的一篇文章，- -「對于 NTA 和 IDA 配基你需要知道哪些」。
鎳，鈷，銅是進行純化 His 標簽蛋白的被廣泛使用的離子，由于他們在水溶液中對于組氨酸和半胱氨酸良好的親和性。在這三個離子中，鎳是泛使用的金屬離子，它呈現(xiàn)出的親和性和選擇性對于 His 標簽蛋白. 然而，它也會非特異性的結(jié)合包含組氨酸群的內(nèi)源蛋白。
從另一個側(cè)面講，鈷提供特異性的結(jié)合和組氨酸標簽因此當純度是首要選擇時鈷是二價陽離子的選。
銅離子和鎳鈷離子相比和 His 標簽蛋白的結(jié)合非常強勁，但是它的特異性在三種離子中是弱的。由于這個原因，當純度不是主要的目的時銅離子 IMAC 被使用。

His（6xHis）單抗