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超微量總ATP酶實驗代測

測定原理：ATP酶可分解ATP生成ADP及無機磷，測定無機磷的量可判斷ATP酶活力的高低。
ATP酶存在于組織細(xì)胞及細(xì)胞器的膜上，是生物膜上的一種蛋白酶，它在物質(zhì)運送、能量轉(zhuǎn)換以及信息傳遞方面具有重要的作用，機體在缺氧及一些疾病狀態(tài)下，此酶活力發(fā)生一系列改變，另外有些遺傳疾病也與此酶活力有關(guān)。ATP酶活力的大小是各種細(xì)胞能量代謝及功能有無損傷的重要指標(biāo)。

ATP酶又稱為三磷酸腺苷酶，是一類能將三磷酸腺苷（ATP）催化水解為二磷酸腺苷（ADP）和磷酸根離子的酶，這是一個釋放能量的反應(yīng)。在大多數(shù)情況下，能量可以通過傳遞而被用于驅(qū)動另一個需要能量的化學(xué)反應(yīng)。這一過程被所有已知的生命形式廣泛利用。

 產(chǎn)品優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取樣本量100ul。
3、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
4、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
5、回收試驗： X =103.3%。
6、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強。
7、測試面廣：可測動物組織、紅細(xì)胞以及各種培養(yǎng)細(xì)胞、各種水產(chǎn)等，效果均佳。
所需儀器及自備試劑：
1、分光光度計/酶標(biāo)儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為636nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器

樣本收集與前處理：
紅細(xì)胞：需按照試劑盒中說明書上紅細(xì)胞的測定方法進(jìn)行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細(xì)胞：常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說明書。

操作流程：
1、酶促反應(yīng)：按說明操作加入樣本100l和混合試劑，37℃準(zhǔn)確反應(yīng)10分鐘
2、加R4，3500轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘，取上清
3、定磷：取上清液加入顯色劑，室溫靜置2分鐘加R6
4、室溫靜置5分鐘636nm波長，1cm光徑，比色

超微量總ATP酶實驗代測