重組單體鏈霉親和素（r-mSA）

品    名：重組單體鏈霉親和素（r-mSA）

英文名稱：Recombinant monomeric streptavidin,

規(guī)    格：1 mg ，10 mg ，100 mg ，500 mg

產(chǎn)品形式：冷凍干粉（5mM  磷酸鉀鹽緩沖液、海藻糖，pH 7.4）

分 子 量：?jiǎn)误w 15.7kDa

活    性：≥8U/mg 蛋白

純    度：≥95%（SDS-PAGE 檢測(cè)）

濃度測(cè)定：紫外吸收法，消光系數(shù) E(0.1% at 280 nm)=2.415

來(lái)    源：大腸桿菌發(fā)酵工程菌株

保存條件：-20℃保存

有 效 期：1 年

相關(guān)介紹：

鏈霉親和素（Streptavidin，SA）是阿維丁鏈霉菌（Streptomyces avidinii）在生長(zhǎng)過(guò)程中分泌的一 種同型四聚體蛋白。同親和素一樣，一摩爾的鏈霉親和素可以結(jié)合四摩爾的生-物素，與生-物素具有很高的親和力。由于 SA 不含糖基且等電點(diǎn)接近于中性，因此 SA 在檢測(cè)應(yīng)用中具有比親和素更低的 非特異性結(jié)合水平。

該制品已被廣泛應(yīng)用于多種生物技術(shù)領(lǐng)域，諸如：包被免疫檢測(cè)用微孔板，制備 SA  偶聯(lián)酶制 劑，SA 偶聯(lián)熒光素、SA 偶聯(lián)磁珠等，進(jìn)而參與酶聯(lián)免疫吸附和酶催化放大實(shí)驗(yàn)，免疫組化化學(xué)、 生物分子純化、生物傳感器、生物納米微球、預(yù)靶向制藥研究和生物芯片被料等。該重組單體鏈霉 親和素具有易洗脫，空間位阻小等優(yōu)點(diǎn)。 (該重組鏈霉親和素 N 端含 His-Tag 標(biāo)簽，C 端含 FLAG 標(biāo) 簽，pI：5.68)

使用方法：（僅供參考）

由于產(chǎn)品生產(chǎn)工藝中凍干環(huán)節(jié)會(huì)引入保護(hù)劑等，為減少您的實(shí)驗(yàn)誤差，建議先通過(guò)內(nèi)部檢測(cè)方 法，產(chǎn)品中蛋白進(jìn)行準(zhǔn)確定量后，再進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)，并按實(shí)際情況進(jìn)行產(chǎn)品用量調(diào)整。建議優(yōu)先選 擇紫外吸收法進(jìn)行定量，方法如下：

將樣品從低溫條件下拿出后，平衡至室溫，并擦去瓶外附著的冷凝水，小心打開(kāi)瓶蓋，防止干 粉飛濺損失。用去離子水或緩沖液進(jìn)行復(fù)溶，充分溶解后，稀釋至合適濃度，小心移入比色皿中， 以去離子水或緩沖液為空白對(duì)照，測(cè)定樣品在 280 nm 處的吸光值（建議吸光值控制在 0.1-1.5 區(qū)間內(nèi)），將其代入以下公式計(jì)算蛋白質(zhì)濃度：

式中：C：樣品原液的蛋白質(zhì)質(zhì)量濃度（mg/mL）

A280nm ：蛋白質(zhì)溶液在 280nm 處測(cè)得的吸光值 N：稀釋倍數(shù)

E(0.1% at 280nm) ：1 mg/mL 蛋白質(zhì)的消光系數(shù)

例如將本產(chǎn)品凍干粉充分溶解并混勻后，取適量原液稀釋 10  倍，測(cè)得其在 280 nm  處的吸光值為 0.7245，則原液的蛋白濃度為 10×0.7245/2.415=3 mg/mL。

注意事項(xiàng)：

1.  鏈霉親和素凍干粉易溶于水，溶解性可達(dá) 10 mg / mL  或更高；

2.  建議使用純水溶解；

3.  如有未溶解物質(zhì)，建議延長(zhǎng)復(fù)溶時(shí)間。也可以通過(guò)離心或其他方式除去不溶物后，再用于后 續(xù)實(shí)驗(yàn)，不會(huì)對(duì)總蛋白產(chǎn)生很大的影響。

4.  考慮到蛋白質(zhì)特殊性，凍干粉建議現(xiàn)用現(xiàn)配，溶解后應(yīng)避免反復(fù)凍融，如需多次使用，建議 按需分裝后凍存（-20℃) ; 不建議在4℃下長(zhǎng)期存放。