信帆生物專業(yè)提供脂肪酶（LPS），產品質量穩(wěn)定，*，確保銷售給客戶的產品是能夠符合質量標準,適合客戶要求的產品。本產品*，歡迎新老客戶前來咨詢訂購.

測定意義：

LPS又稱甘油酯水解酶，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和單酯）。LPS廣泛的存在于各種生物中。血清中LPS的異常增高常見于胰腺炎和胰腺癌。

測定原理：

LPS催化油酯水解成脂肪酸，利用銅皂法測定脂肪酸生成速率，即可計算LPS活性。

自備儀器和用品：

研缽、臺式離心機、震蕩混勻器、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、可調式移液槍、甲苯、無水乙醇、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制：

試劑一：液體×2瓶，4℃保存。

試劑二：液體×1瓶，室溫保存。

試劑三：液體×1瓶，4℃保存。

標準品×1瓶，10 µmol/mL的標準溶液，室溫保存。臨用前加入3.168 mL無水乙醇，充分溶解。

粗酶液提取：

稱取約0.1g樣品，加試劑一1 mL充分研磨，16000rpm 4℃離心40min，取上清液待測。

LPS測定操作：

1. 分光光度計預熱30 min以上，調節(jié)波長到710 nm，蒸餾水調零。

2. 試劑一和試劑二置于37℃水浴預熱30min以上。

3. 空白管：取1.5 mL EP管，依次加入150μL試劑一和50μL試劑二，反復震蕩混勻；加入5μL蒸餾水，迅速震蕩混勻后置于37℃水浴準確反應10 min；加入400μL甲苯，反復震蕩混勻后，室溫4000rpm離心10min；取出離心管，小心吸取上層溶液200μL，加入另一1.5mL EP管，再加入50μL試劑三，反復震蕩混勻；室溫4000rpm離心10min，小心吸取上層溶液150μL，加入微量石英比色皿/96孔板，于710nm處測定吸光值。記為A空白管。

4. 標準管：取1.5 mL EP管，依次加入150μL試劑一和50μL試劑二，反復震蕩混勻；加入5μL標準品，迅速震蕩混勻后置于37℃水浴準確反應10min；加入400μL甲苯，反復震蕩混勻后，室溫4000rpm離心10min；取出離心管，小心吸取上層溶液200μL，加入另一1.5mL EP管，再加入50μL試劑三，反復震蕩混勻；室溫4000rpm離心10min，小心吸取上層溶液150μL，加入微量石英比色皿/96孔板，于710nm處測定吸光值。記為A標準管。

5. 測定管：取1.5mL EP管，依次加入150μL試劑一和50μL試劑二，反復震蕩混勻；加入5μL上清液，迅速震蕩混勻后置于37℃水浴準確反應10min；加入400μL甲苯，反復震蕩混勻后，室溫4000rpm離心10min；取出離心管，小心吸取上層溶液200μL，加入另一1.5mL EP管，再加入50 μL試劑三，反復震蕩混勻；室溫4000rpm離心10 min，小心吸取上層溶液150 μL，加入微量石英比色皿/96孔板，于710nm處測定吸光值。記為A測定管。

注意事項：

1、甲苯有毒，實驗過程中需佩戴手套和口罩。

2、實驗過程中須遠離火源。

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