Masson-三色染色液產(chǎn)品使用說明

產(chǎn)品名稱：Masson-三色染色液

規(guī)格：7×50ml

儲存條件：室溫，避光

有效期：12個月

用途：經(jīng)典膠原纖維染色,可區(qū)分膠原纖維和肌纖維。

產(chǎn)品簡介：

結(jié)締組織狹義上是指其含有的三種纖維：膠原纖維、網(wǎng)狀纖維、彈力纖維，而膠原纖維(collagen fiber)是分布-廣、含量多的一種纖維。Masson 三色染色又稱馬松染色，是結(jié)締組織染色中-經(jīng)典的一種方法，是膠原纖維染色權(quán)-威而經(jīng)典的技術(shù)方法。所謂三色染色通常是指染胞核和能選擇性的顯示膠原纖維和肌纖維，該法染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關(guān)：分子的大小由分子量來體現(xiàn)，小分子量易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織；而大分子量則只能進(jìn)入結(jié)構(gòu)疏松的、滲透性高的組織，然而淡綠或苯胺藍(lán)的分子量都很大，因此 Masson 染色后肌纖維呈紅色，膠原纖維呈綠色(淡綠)或藍(lán)色(苯胺藍(lán))，主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。

Masson 三色染色的特點：①染色穩(wěn)定；②分化時間短；③色彩清晰鮮艷；④適用范圍廣，適宜于組織的石蠟切片、冰凍切片等染色；⑤所染切片保存時間長且不易褪色。

自備材料：

1、固定液：選用甲醛升-汞或甲醛鹽溶液

2、蒸餾水、系列乙醇、二甲苯或環(huán)保浸蠟脫蠟透明液

操作步驟(僅供參考)：

正式染色操作開始前請先做預(yù)實驗。

1、切片常規(guī)脫蠟至水，用配制好的 Weigert 鐵蘇木素染色 5～10min。

2、用酸性乙醇分化液分化 2~10s，水洗。

3、用 Masson 藍(lán)化液返藍(lán) 30~60s，蒸餾水洗 1min。

4、麗春紅品紅染色液染色 5～10min，蒸餾水稍洗。

5、磷鉬酸溶液洗 2～5min(不經(jīng)水洗)。

6、直接入苯胺藍(lán)染色液中染色 1～3min(不經(jīng)水洗)。

7、用弱酸溶液沖洗切片，至無藍(lán)色脫出(必要時，可鏡下控制)。

8、95%乙醇快速脫水，無水乙醇脫水 3 次，每次 5～10s。

9、二甲苯或脫蠟透明液透明 3 次，每次 1～2min，中性樹膠封固。

染色結(jié)果：

注意事項：

1、本染色液可以用滴染或浸染的方法染色，如片量較少建議用滴染法。

2、切片脫蠟應(yīng)盡量干凈，固定起著重要的作用，使用不同的固定液可延或縮短染色時間。

3、冰凍切片用乙-醚-乙醇混合固定液或甲醛型固定液固定 10s~3min，水洗即可染色。

4、取 A1、A2 等量混合即為 Weigert 鐵蘇木素染液，一般 24h 失去染色力。

5、 酸性乙醇分化時間應(yīng)根據(jù)切片厚薄、組織的類別和新舊而定。

6、該試劑用 Weigert 鐵蘇木素染液染核，也可用 Harris 蘇木素染液染核，但染核后顏色不夠鮮艷，本染色方法主要為了區(qū)分膠原纖維和肌纖維，兩者鮮艷清晰即可，可不染核。

7、蘇木素染核(藍(lán)色)、麗春紅酸性品紅染肌纖維(紅色)、苯胺藍(lán)(藍(lán)色)或固綠(綠色)染色膠原纖維，用固綠復(fù)染可實現(xiàn)三色染色，用苯胺藍(lán)只有兩種顏色。

8、弱酸溶液可使色彩更清晰鮮艷，如使用量大可自行配制 0.1～0.3%乙酸溶液予以替代。

9、磷鉬酸的作用是將被紅染的膠原纖維分化至無色或淡紅色，肌纖維、纖維素仍呈紅色，另外對膠原纖維起媒染作用，使膠原纖維與大分子染料更容易的結(jié)合，分化時間根據(jù)染色深淺而定，一般 1～2min。

10、Masson 藍(lán)化液亦可自行配制 Scott 促藍(lán)液或 0.1～1%碳-酸鋰水溶液予以替代。

11、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

12、本產(chǎn)品僅供科研實驗用，不做其他用途。